供应室建筑布局必须严格按照“三区制"进行分区，分为去污区（污染区），检查、包装及灭菌区（清洁区），无菌物品存放区（无菌区），三区划分清楚，且工作区和辅助区（生活区）进行物理分隔，各区之间设缓冲间，区域间应有设备屏障，即去污区与检查、包装及灭菌区之间——全自动清洗消毒机、传递窗和干燥柜；检查、包装及灭菌区（清洁区）与无菌区之间——脉动真空蒸汽灭菌器；无菌区与发放间之间——互锁式传递窗。

工艺流程布局为单向由“污”到“洁”的流水作业线：物品流线保证由污到洁，强制通过，不得逆行。空气流向由洁到污，去污区保持相对负压，检查、包装及灭菌区保持相对正压。人员流线、物品流线是消毒供应室设计的重点，物品单向循环、洁污分离就是有效地防止污染、避免交叉感染。污物物品入口与无菌物品发放口单独设立，不可有交叉。消毒供应室的污染物品、清洁物品、无菌物品等都有各自不同的流线，各流线单向循环。

消毒供应室内部工作人员必须设立独立出入口，与工作区物品回收发放扩分开。更衣室应设在入口处，工作人员通过换鞋更衣后进入供应室内部，在进入各个功能区域时进行二次更衣，及工作人员在进入其他工作区域时都需要经过缓冲间进入。

流程图示如下：

①污染区工作人员流线：换鞋→更衣→休息室→缓冲区→污染区。

②清洁区工作人员流线：换鞋→更衣→休息室→缓冲区→检查、包装及灭菌区。

③无菌区工作人员流线：换鞋→更衣→休息室→缓冲区→无菌区。